2017年我國(guó)頒布《細(xì)胞治療產(chǎn)品研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）》以來(lái)，按照藥品進(jìn)行研發(fā)并申報(bào)臨床試驗(yàn)的細(xì)胞治療產(chǎn)品大量涌現(xiàn)。隨著我國(guó)兩款CAR-T細(xì)胞治療產(chǎn)品獲批上市，制藥企業(yè)的研發(fā)熱情高漲，聯(lián)合“十四五”重點(diǎn)規(guī)劃及政府工作報(bào)告、兩會(huì)委員提案，細(xì)胞治療行業(yè)將進(jìn)入行業(yè)發(fā)展的“快車(chē)道”。然而細(xì)胞治療產(chǎn)品來(lái)源多樣，生物學(xué)特性復(fù)雜，生產(chǎn)過(guò)程要求高，研發(fā)者如何在快車(chē)道上加速？本文結(jié)合專(zhuān)業(yè)CRO細(xì)胞治療產(chǎn)品研發(fā)優(yōu)勢(shì)，梳理細(xì)胞治療產(chǎn)品IND策略，以供參考。
1.申報(bào)資料要求
1.1 申報(bào)形式和資料要求
細(xì)胞治療產(chǎn)品按照《生物制品注冊(cè)分類(lèi)及申報(bào)資料要求》進(jìn)行臨床試驗(yàn)申請(qǐng)，需要提供相關(guān)產(chǎn)品的藥學(xué)、非臨床研究等相關(guān)信息，注冊(cè)申報(bào)資料應(yīng)當(dāng)按照《M4：人用藥物注冊(cè)申請(qǐng)通用技術(shù)文檔（CTD）》（以下簡(jiǎn)稱(chēng)CTD）撰寫(xiě)。根據(jù)2022年11月4日NMPA《關(guān)于藥品注冊(cè)申請(qǐng)實(shí)施電子申報(bào)的公告（征求意見(jiàn)稿）》等文件要求，此類(lèi)注冊(cè)申請(qǐng)將施行電子申報(bào)，因此申請(qǐng)人需要對(duì)申報(bào)資料進(jìn)行專(zhuān)業(yè)的撰寫(xiě)以滿(mǎn)足CTD電子申報(bào)資料的相關(guān)要求。
2.IND藥學(xué)研究重點(diǎn)
2.1 生產(chǎn)環(huán)境須符合GMP要求
人體臨床試驗(yàn)用病毒、細(xì)胞均需在符合藥品GMP條件下生產(chǎn)。生產(chǎn)中使用的質(zhì)粒視具體使用情況具體分析，若質(zhì)粒是直接用于人體細(xì)胞體外基因編輯操作的載體，建議在GMP條件下生產(chǎn)。
細(xì)胞治療產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程中，應(yīng)盡量避免使用動(dòng)物和人來(lái)源的血清，如必須使用，申請(qǐng)人應(yīng)提供充分的研究資料，說(shuō)明在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中使用血清的必要性。
2.2 生產(chǎn)工藝應(yīng)經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)化研究評(píng)價(jià)
申報(bào)臨床試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)確定與開(kāi)展臨床試驗(yàn)階段相適應(yīng)的細(xì)胞藥物生產(chǎn)工藝的步驟、參數(shù)、以及生產(chǎn)過(guò)程控制措施等；生產(chǎn)工藝應(yīng)經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)室工藝至人體臨床試驗(yàn)用工藝的轉(zhuǎn)化研究評(píng)價(jià)，支持工藝的合理性和穩(wěn)健性，能夠滿(mǎn)足臨床期間細(xì)胞藥物的供應(yīng)需求，保證產(chǎn)品的安全性和工藝、質(zhì)量的可控性。
如果臨床試驗(yàn)期間需要進(jìn)行生產(chǎn)工藝等的變更，建議參考CDE《臨床試驗(yàn)期間生物制品藥學(xué)研究和變更技術(shù)指導(dǎo)原則》（征求意見(jiàn)稿）、ICHQ5E等國(guó)內(nèi)外有關(guān)變更相關(guān)技術(shù)指導(dǎo)原則開(kāi)展充分研究，分析變更前后產(chǎn)品安全性、有效性（視具體情況）和質(zhì)量可控性等方面的可比性。若確需在關(guān)鍵性臨床試驗(yàn)開(kāi)始后改變關(guān)鍵生產(chǎn)工藝和參數(shù)，應(yīng)進(jìn)行充分的工藝變更前后可比性研究和評(píng)估，必要時(shí)，還需開(kāi)展動(dòng)物或人體臨床橋接試驗(yàn)。申請(qǐng)人可就變更研究方案和藥審中心開(kāi)展溝通交流。
細(xì)胞治療產(chǎn)品無(wú)法耐受病毒滅活工藝的操作處置，也無(wú)法進(jìn)行終端滅菌或除菌過(guò)濾，因此需要對(duì)生產(chǎn)過(guò)程進(jìn)行控制。生產(chǎn)過(guò)程中應(yīng)在適當(dāng)?shù)纳a(chǎn)環(huán)節(jié)，設(shè)立生產(chǎn)過(guò)程控制的檢測(cè)項(xiàng)目和驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)，以確保產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程得到監(jiān)控，并且保證不同批次間質(zhì)量控制的一致性。另外，還應(yīng)確保生產(chǎn)全過(guò)程（包括從組織/細(xì)胞采集過(guò)程、生產(chǎn)、運(yùn)輸?shù)脚R床應(yīng)用整個(gè)過(guò)程）的可追溯性。
2.3 菌種庫(kù)、細(xì)胞庫(kù)應(yīng)滿(mǎn)足要求
應(yīng)當(dāng)采用歷史培養(yǎng)情況清晰明確、來(lái)源合規(guī)、質(zhì)量能夠滿(mǎn)足與研發(fā)階段相適應(yīng)、且可確保產(chǎn)品的質(zhì)量安全的菌株或細(xì)胞，建議申請(qǐng)人根據(jù)所購(gòu)買(mǎi)細(xì)胞的具體途徑提供其溯源信息，包括但不限于證明性文件、培養(yǎng)過(guò)程、傳代及檢定信息等。建議在滿(mǎn)足中國(guó)藥典、ICH及相關(guān)指導(dǎo)原則的前提下，結(jié)合產(chǎn)品的實(shí)際情況建立菌種庫(kù)、細(xì)胞庫(kù)并進(jìn)行全面的檢定。
2.4 慢病毒包裝系統(tǒng)、質(zhì)粒系統(tǒng)的選擇
慢病毒包裝系統(tǒng)目前常用第三代四質(zhì)粒病毒包裝系統(tǒng)，如果申請(qǐng)人擬采用慢病毒系統(tǒng)，鼓勵(lì)使用安全性更高的質(zhì)粒系統(tǒng)包裝慢病毒以及含有末端自我失活（Self Inactivating, SIN）結(jié)構(gòu)的病毒載體。如果采用風(fēng)險(xiǎn)較高的質(zhì)粒系統(tǒng)，需要對(duì)潛在的高風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評(píng)估，并說(shuō)明采用高風(fēng)險(xiǎn)質(zhì)粒系統(tǒng)的合理性，如果無(wú)法提供充分的依據(jù)，建議開(kāi)展相應(yīng)的安全性研究。
2.5 穩(wěn)定性研究
參照ICH技術(shù)指導(dǎo)原則Q5C、《生物制品穩(wěn)定性研究指導(dǎo)原則》、《細(xì)胞治療產(chǎn)品研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則》及《細(xì)胞治療產(chǎn)品申報(bào)臨床試驗(yàn)藥物研究和申報(bào)資料的考慮要點(diǎn)》合理設(shè)計(jì)穩(wěn)定性研究方案，包括研究的批次情況、研究條件、檢測(cè)項(xiàng)目和檢測(cè)頻率等。臨床試驗(yàn)申報(bào)資料中，細(xì)胞制劑的穩(wěn)定性研究應(yīng)涵蓋樣品的保存、運(yùn)輸和使用的各個(gè)階段，在滿(mǎn)足臨床應(yīng)用基本要求的前提下，可于臨床試驗(yàn)期間進(jìn)一步補(bǔ)充和完善穩(wěn)定性研究。
細(xì)胞治療產(chǎn)品的穩(wěn)定性研究樣品建議依據(jù)特定細(xì)胞的可獲及性，對(duì)代表性樣本開(kāi)展研究，包括采集的組織/細(xì)胞樣本、生產(chǎn)過(guò)程中間樣品、細(xì)胞終產(chǎn)品、臨床使用過(guò)程中樣品等，研究用樣品的細(xì)胞密度和體積范圍應(yīng)可代表實(shí)際生產(chǎn)和使用條件。細(xì)胞治療產(chǎn)品的穩(wěn)定性研究還需要結(jié)合產(chǎn)品自身的特點(diǎn)設(shè)計(jì)研究方案，例如，如果產(chǎn)品為液體劑型，需要在研究中關(guān)注振蕩對(duì)細(xì)胞的影響；如果產(chǎn)品為冷凍劑型，需要在研究中關(guān)注凍存、復(fù)蘇對(duì)細(xì)胞的影響等。
2.6 無(wú)菌、支原體、RCL等安全性指標(biāo)檢測(cè)
基于細(xì)胞治療藥物的特點(diǎn)，申請(qǐng)人可以開(kāi)發(fā)新型的無(wú)菌和支原體的檢測(cè)方法進(jìn)行放行檢測(cè)，但是檢測(cè)方法應(yīng)經(jīng)過(guò)充分驗(yàn)證。
基于RCL（慢病毒復(fù)制回復(fù)突變）作為一個(gè)重要安全性風(fēng)險(xiǎn)關(guān)注點(diǎn)，臨床試驗(yàn)申報(bào)時(shí)，建議申請(qǐng)人按照通用指導(dǎo)原則采用經(jīng)驗(yàn)證的指示細(xì)胞培養(yǎng)法完成病毒（上清液、生產(chǎn)終末期細(xì)胞）的RCL檢測(cè)。對(duì)于細(xì)胞終產(chǎn)品，可采用經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證的快速方法進(jìn)行RCL的檢測(cè)放行，同時(shí)進(jìn)行留樣，必要時(shí)用指示細(xì)胞培養(yǎng)法進(jìn)行回溯檢測(cè)分析。此外，提請(qǐng)申請(qǐng)人在生產(chǎn)過(guò)程中對(duì)RCL進(jìn)行監(jiān)控。對(duì)于風(fēng)險(xiǎn)較高的產(chǎn)品（如基于質(zhì)粒系統(tǒng)的選用），RCL的檢測(cè)要求需適當(dāng)提高。細(xì)胞培養(yǎng)法每批檢測(cè)時(shí)需設(shè)置合理的陽(yáng)性、陰性對(duì)照，檢測(cè)方法的靈敏度和檢測(cè)樣本量需達(dá)到臨床研究使用劑量的安全性需要，同時(shí)應(yīng)考慮病毒顆粒對(duì)RCL檢測(cè)的抑制效果。
2.7 容器和包材信息
申請(qǐng)臨床試驗(yàn)階段，建議提供容器和包材的來(lái)源、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、生物安全性研究數(shù)據(jù)等基本信息。在申報(bào)臨床試驗(yàn)前應(yīng)完成初步的產(chǎn)品與包裝容器（可采用小規(guī)格同材質(zhì)包裝）的相容性評(píng)估，確保臨床使用的安全性，特別應(yīng)關(guān)注細(xì)胞、輔料成分（如DMSO）與容器的相容性及存在的安全性風(fēng)險(xiǎn)。
3.干細(xì)胞備案臨床研究(IIT)申請(qǐng)藥品注冊(cè)臨床試驗(yàn)
3.1 干細(xì)胞備案臨床研究結(jié)果可用于藥品評(píng)價(jià)
對(duì)于干細(xì)胞備案臨床研究，如申請(qǐng)藥品注冊(cè)臨床試驗(yàn)，可將已獲得的臨床研究結(jié)果作為技術(shù)性申報(bào)資料提交并用于藥品評(píng)價(jià)。
3.2 干細(xì)胞備案臨床研究進(jìn)行IND的資料要求
如果申辦者向藥品監(jiān)督管理部門(mén)遞交藥物臨床試驗(yàn)申請(qǐng)之前，已按管理辦法要求開(kāi)展了備案的干細(xì)胞臨床研究，并擬用于藥品注冊(cè)申報(bào)，應(yīng)按照《生物制品注冊(cè)分類(lèi)及申報(bào)資料要求》，提供備案臨床研究中使用的干細(xì)胞相關(guān)產(chǎn)品的藥學(xué)、非臨床及臨床研究相關(guān)信息，其中，臨床研究報(bào)告應(yīng)按照《ICH E3：臨床研究報(bào)告的結(jié)構(gòu)與內(nèi)容》進(jìn)行撰寫(xiě)并提交。
4.免疫細(xì)胞治療產(chǎn)品藥學(xué)研究申報(bào)要點(diǎn)
4.1 申報(bào)臨床試驗(yàn)時(shí)需要完成的藥學(xué)研究
一般情況下，申報(bào)臨床試驗(yàn)時(shí)需要完成以下研究：對(duì)生產(chǎn)過(guò)程中使用的原材料和輔料，尤其是人源/動(dòng)物源性材料，開(kāi)展充分的安全性分析，評(píng)估使用的必要性和合理性。
申報(bào)臨床試驗(yàn)階段的藥學(xué)技術(shù)要求需結(jié)合產(chǎn)品的自身特點(diǎn)和生產(chǎn)工藝具體情況進(jìn)行整體的評(píng)價(jià)與判斷。為了保障受試者的安全，臨床試驗(yàn)申請(qǐng)通常重點(diǎn)關(guān)注與安全性相關(guān)的方面，例如生產(chǎn)用原材料的質(zhì)量控制、降低混淆/污染/交叉污染風(fēng)險(xiǎn)的措施、工藝穩(wěn)定性、與安全性相關(guān)的關(guān)鍵質(zhì)量屬性、非臨床研究樣品/非注冊(cè)臨床研究樣品（如適用）與臨床試驗(yàn)樣品的質(zhì)量可比性等。
申報(bào)臨床試驗(yàn)階段，貯存、運(yùn)輸和使用的穩(wěn)定性研究條件應(yīng)具有代表性，穩(wěn)定性研究數(shù)據(jù)應(yīng)能支持臨床樣品的實(shí)際貯存等條件。直接接觸樣品的材料需經(jīng)過(guò)安全性和適用性的評(píng)估。
5.基因修飾細(xì)胞治療產(chǎn)品申報(bào)考慮要點(diǎn)
5.1 CAR修飾的免疫細(xì)胞治療產(chǎn)品
5.1.1 生產(chǎn)原料（供者細(xì)胞、試劑/培養(yǎng)基）
自體細(xì)胞篩查應(yīng)參照醫(yī)療管理的相關(guān)規(guī)定，進(jìn)行HIV-1/2、HBV、HCV、梅毒等感染項(xiàng)篩查。供者細(xì)胞的采集需使用單采機(jī)進(jìn)行。
5.1.2 生產(chǎn)工藝（質(zhì)粒、病毒，CAR-T細(xì)胞）
5.1.3 質(zhì)量研究（質(zhì)粒、病毒，CAR-T細(xì)胞）
基于RCR/RCL的高風(fēng)險(xiǎn)性和檢測(cè)方法的復(fù)雜性，關(guān)于檢測(cè)的方法學(xué)、靈敏度、樣品的代表性（病毒生產(chǎn)的終末細(xì)胞、收獲的上清液、CAR-T細(xì)胞產(chǎn)品）等相關(guān)研究，可參照國(guó)內(nèi)外已頒布的通用技術(shù)指導(dǎo)原則。
5.1.4 穩(wěn)定性研究
質(zhì)粒、病毒載體在保存過(guò)程中，應(yīng)對(duì)其穩(wěn)定性進(jìn)行考察，同時(shí)應(yīng)盡量避免病毒載體反復(fù)凍融。
CAR-T細(xì)胞應(yīng)模擬實(shí)際貯存、運(yùn)輸與臨床應(yīng)用條件開(kāi)展穩(wěn)定性研究。
5.1.5 其他
申報(bào)臨床階段重點(diǎn)關(guān)注臨床用藥（回輸細(xì)胞及附帶成分）的整體安全性問(wèn)題，并結(jié)合臨床醫(yī)療探索實(shí)踐中反饋的風(fēng)險(xiǎn)提醒及其他專(zhuān)業(yè)意見(jiàn)進(jìn)行綜合判斷。
5.2 TCR修飾的免疫細(xì)胞治療產(chǎn)品
對(duì)于T細(xì)胞受體（T cell receptor，TCR）修飾的免疫細(xì)胞，非臨床研究應(yīng)盡可能采用多種方法評(píng)估其靶點(diǎn)相關(guān)毒性和脫靶毒性風(fēng)險(xiǎn)。
TCR修飾免疫細(xì)胞的脫靶毒性可通過(guò)評(píng)估TCR與人體自身抗原肽的交叉識(shí)別能力來(lái)評(píng)估。還應(yīng)關(guān)注引入TCR鏈和內(nèi)源性TCR之間的錯(cuò)配可能性，應(yīng)描述和說(shuō)明旨在降低錯(cuò)配可能性的TCR設(shè)計(jì)策略。
5.3 誘導(dǎo)多能干細(xì)胞來(lái)源的細(xì)胞產(chǎn)品
應(yīng)在首次臨床試驗(yàn)前完成致瘤性試驗(yàn)。
5.4 采用基因編輯技術(shù)制備的細(xì)胞產(chǎn)品
對(duì)于采用基因編輯技術(shù)制備的基因修飾細(xì)胞產(chǎn)品，非臨床研究應(yīng)進(jìn)行體外在靶和脫靶活性評(píng)估，以確認(rèn)修飾酶或向?qū)NA對(duì)靶基因序列的特異性。
目前，國(guó)內(nèi)新藥臨床研究綜合服務(wù)一體化的第三方機(jī)構(gòu)仍為數(shù)不多，提供新藥和細(xì)胞治療產(chǎn)品臨床試驗(yàn)申請(qǐng)、臨床研究、注冊(cè)上市、上市后研究等全流程咨詢(xún)與服務(wù)的CRO，將能最大程度幫助申辦方在研發(fā)過(guò)程中減少風(fēng)險(xiǎn)、降低成本、縮短研發(fā)周期，從而加快藥品獲批上市。
（來(lái)源：醫(yī)前沿）